胺碘酮对小鼠华法林血药浓度的影响

王小萍，马泽通，王永春，孙维红#，文友民

（宁夏医科大学总医院药剂科，宁夏银川750004）

[摘要]目的探讨胺碘酮对小鼠华法林血药浓度的影响。方法96只小鼠随即分为华法林对照组，胺碘酮30、60、120mg•kg^-1组，每天上午给各组小鼠灌华法林，下午灌生理盐水或胺碘酮。7d后取血，用高效液相色谱测定华法林血药浓度。结果与对照组比较，胺碘酮30mg•kg^-1组华法林血药浓升高度无统计学意义（P>0.05），胺碘酮60、120mg•kg^-1组华法林血药浓度升高有统计学意义（P<0 .05）；胺碘酮各剂量组之间华法林浓度比较，均有统计学意义性（P＜0.05）。结论胺碘酮60mg·kg^-1可呈剂量依赖性的抑制华法林的代谢，使后者血药浓度增高。

[关键词]胺碘酮；华法林；血药浓度；小鼠

胺碘酮作为一种安全、高效的抗心律失常药物^[1]，已被广泛应用于各种心律失常的治疗中。华法林可防治血栓性疾病，心律失常的患者易形成血栓，常用华法林防止血栓形成，所以心律失常的患者合用胺碘酮和华法林的机率较高，因此临床上常见胺碘酮与华法林合用的病例。而两药的药理特性各异，合用时胺碘酮可使华法林浓度增加，从而延长凝血酶原时间（PT）和国际标准化值（INR），使用不当将增加出血机率^[2]。目前两药合用时，主要通过测定INR并将其值一般控制在2～3而预防出血^[3]。INR安全范围较小，很难准确控制，若华法林血药浓度的数值被精确测出，则更易预防出血。目前有关不同剂量胺碘酮对华法林血药浓度影响的报道仍较少。为此，本实验以小鼠为对象，设置不同的胺碘酮剂量组，通过测定血浆中华法林浓度，来研究胺碘酮对华法林血药浓度的影响，以及胺碘酮的剂量是否具有依赖性。

1材料与方法

1.1动物：昆明种小鼠96只，雌雄各半，体重在(20±2)g，清洁级，合格证号: SYXK (宁) 2012-0001，购自宁夏医科大学实验动物中心。动物预养1w后实验，实验期间小鼠自由进食及饮水。

1.2试药、试剂的配置：取盐酸胺碘酮（规格0.2g/片，赛诺菲安万特杭州制药，批号：185.2012.11）12片溶于200 ml生理盐水（NS），为胺碘酮高剂量（12g/L）试药(200ml)，予胺碘酮高剂量试药(100 ml)加入100 ml NS为胺碘酮中剂量（6g/L）试药(200 ml)，予胺碘酮中剂量试药(100 ml)加入100 ml NS为胺碘酮低剂量（3g/L）试药(200 ml)。取华法林钠片（规格：2.5 mg/片，齐鲁制药，批号103003KA）6片溶于250 ml NS，得华法林试药(200 ml)。肝素钠（25 000U：2ml）注射液一支加入8 ml NS，为抗凝剂（1%肝素钠溶液）。

1.3仪器：高速离心机（TGL-16B型上海安亭科学仪器厂）；涡旋混合器（XH-B型姜堰康维仪器厂）；Agilent1200高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；配有自动进样器、四元梯度泵、可控柱温箱、紫外检测器，梅特勒AE240电子天平（Mettler托利多仪器上海有限公司），氮吹仪HGC-12。

1.4方法

1.4.1小鼠分组及喂养：选取昆明小鼠96只，雌雄各半，体重20±2g，自由进食、进水，饲养环境温度为26.5±0.5℃，湿度为43.3%，自然光照。将小鼠称重并按体重随机分为4组，为胺碘酮低、中、高剂量组及华法林对照组，分别灌胃胺碘酮30mg·kg^-1+华法林0.6mg·kg^-1、胺碘酮60mg·kg^-1+华法林0.6mg·kg^-1、胺碘酮120mg·kg^-1+华法林0.6mg·kg^-1及生理盐水+华法林0.6mg·kg^-1，每组24只。喂养7d，实验期间每天称小鼠体重1次，按0.1ml/10g的体积给药，并随时注意各组小鼠体重变化情况，观察食欲、进水量、粪便、皮肤，记录死亡情况。

1.4.2血药浓度的测定：各组小鼠实验7d后，于末次给药12h后，采用眼球摘除方法取血，加入抗凝剂后静置30min，离心（14000r·min^-1，1min）后取血浆，用乙腈沉淀法（1200r·min^-1，10min）处理后，进行高效液相色谱检测。

1.5 统计学处理：用SPSS11.5软件包进行统计分析，实验结果以±s表示，比较采用One-way ANOVA分析，P﹤0.05有统计学意义。

2结果

与华法林对照组比较，胺碘酮低剂量组华法林血药浓度差异无统计学意义（P>0.05），胺碘酮中、高剂量组华法林血药浓度增高差异有统计学意义（P<0 .05）；胺碘酮各剂量组间比较，华法林血药浓度差异有统计学意义（P<0 .05），见表1。

表1胺碘酮对小鼠华法林血药浓度的影响（±s）

注：与华法林对照组比较，^☆P<0 .05；胺碘酮各剂量组之间比较，^△P<0 .05。

3讨论

本实验通过对正常小鼠予不同剂量的胺碘酮和一定剂量的华法林，连续灌胃7d，采血离心后，测定血浆中华法林的浓度，以研究胺碘酮对小鼠华法林代谢的抑制作用，以及是否具有剂量的依赖性。实验设置胺碘酮三个剂量实验组和华法林对照组。结果表明，与华法林对照组比较，胺碘酮30mg·kg^-1组无统计学意义性（P＞0.05），胺碘酮60mg·kg^-1、120mg·kg^-1组有统计学意义（P＜0.05）；胺碘酮的各剂量组之间比较，均有统计学意义性（P＜0.05）。即一定剂量的胺碘酮60mg·kg^-1对华法林有抑制作用，且呈剂量依赖性，与文献报道一致^[4]，其机制可能为①胺碘酮及其代谢产物使肝内代谢的立体选择性改变，主要通过抑制CYP2C9和CYP1A2活性，使R-华法林转化为R-1-S华法林醇，R，S-华法林氧化成酚类代谢产物的过程受影响，尤其是S-华法林转化成其主要代谢产物S-7-羟基华法林被抑制，导致血中S-华法林浓度增高^[5]；②胺碘酮的活性代谢产物脱乙基胺碘酮是CYP2C9活性的主要抑制剂，胺碘酮还可引起S-R-华法林清除率降低，从而增强华法林的抗凝作用^[6]；③也有作者^[7]认为，胺碘酮主要通过非选择性降低S-和R-华法林清除率。本实验得出的胺碘酮可剂量依赖性的抑制华法林的代谢，使后者血药浓度增高，可为该两种药物的合理使用提供理论依据。

胺碘酮60mg·kg^-1可使小鼠体内华法林的血药浓度升高，且随着胺碘酮浓度的升高，其抑制华法林代谢的作用越强，呈现浓度依赖性。

参考文献

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[5] 徐建华，邹颖.胺碘酮可增强华法林的抗凝作用分析[J].南通大学学报（医学版）,2012, 32(3):243-244.

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